分离洛伐他汀使用的树脂



洛伐他汀是一咱脂溶性物质,易溶于乙酸乙酯、丙酮、乙醇等有机溶剂,看到文献上有用大孔树脂来分的。谁有这方面的经验呀?
洛伐他汀(lovastatin)是目前临床上重要的降血脂药物,是由真菌产生的一种甲基羟二戊酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂。1979年Endo等〔1〕首次报道从红曲霉的发酵液中发现此物质,随后Alberts等〔2〕于1980年报道了洛伐他汀的新产生菌——土曲霉(Aspergillus terreus),并实现了产业化。洛伐他汀具有极性弱,难溶于水,溶于低级醇、酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、苯、甲苯,不溶于石油醚,正已烷。据此分离纯化一般多用溶媒萃取法〔3,4〕,但此法耗用大量溶媒,成本较高,经多次转提,收率较低。我们尝试根据洛伐他汀结构中具有羧酸基团的特性,采用大孔阴离子树脂动态吸附、解吸工艺提取纯化洛伐他汀。

1 材料与方法

1.1 实验材料

发酵菌种采用本公司生产的洛伐他汀生产菌种土曲霉WY9308VS。

乙酸乙酯、乙酸丁酯、丙酮、甲醇、乙醇为分析纯(南京化学试剂厂);盐酸、氢氧化钠为化学纯(上海化学试剂采购供应站);大孔树脂选用D201、D202、D273、D293、D301、D315和D345(华东理工大学华震公司)共7种。

主要设备包括SHB3型循环水真空泵(郑州长城科工贸有限公司);R201型旋转薄膜浓缩仪(上海申胜生物技术有限公司);HPLC510泵486检测器(美国Waters公司);PHS3C酸度计(上海雷磁仪器厂);ZK82B电热干燥箱(上海实验仪器厂);Φ30mm×400mm玻璃吸附柱(上海玻璃仪器厂)。

1.2 方法

1.2.1 发酵液预处理方法 由于洛伐他汀在发酵液中以洛伐他汀羧酸形式存在于菌丝体内,在加入氢氧化钠的碱性条件下可以洛伐他汀酸钠的形式而溶于水。根据这一特性,以6mol/L氢氧化钠调整发酵液的pH至9~13,考察不同pH条件和搅拌时间对洛伐他汀溶出率的影响。以pH3.0搅拌120min条件下的洛伐他汀溶出率作为对照。

1.2.2 大孔阴离子树脂的筛选 根据洛伐他汀具有羧酸基团的特性,选用大孔阴离子树脂D201、D202、D273、D293、D301、D315和D345进行静态吸附筛选。
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